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点击次数:2164 更新时间:2021-04-07
分子筛为什么可以去除盐,其实分子筛本身可以用于去除盐,如果要更换离子柱,须先去除盐。否则,蛋白质就挂不上了。脱盐一般可以使用SephadexG10、25和50,也可以使用透析法。
分子筛层分析其应用领域主要包括以下几点
1)脱盐
高分子(蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质可以通过分子筛层分析去除,这种操作被称为脱盐。本法脱盐操作简单快捷,蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易失活,样品体积到柱床体积的25%-30%,为了防蛋白质脱盐后溶解度下降,沉淀吸附在柱子上,一般用醋酸铵等挥发性盐类缓冲液平衡分析柱,加入样品,用同样的缓冲液清洗,收集的清洗液用冷冻干燥法清除挥发性盐类。
2)分离纯化
分子筛层分析广泛应用于酶、蛋白质、氨基酸、多糖、激素、生物碱等物质的分离。
43)测定高分子物质的分子量:
用一系列已知分子量的标准品放入同一凝胶柱中,在同一条件下分析,记录每分钟成分的清洗体积,用清洗体积对分子量的对数作图,在分子量范围内可以得到直线,即分子量的标准曲线。在测未知物质的分子量时,可将该样品放入测量标准曲线的凝胶柱中清洗后,根据物质的清洗体积,在标准曲线中检测出分子量。
分子筛层析时分离效果依赖于以下因素
填料的颗粒大小
填料颗粒的均匀程度
装柱的好坏
样品的体积和黏度
流速
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